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工業檢支原體與科研檢支原體的區別?

提供者:上海遠慕生物科技有限公司   發布時間:2021/5/6 9:37:02  閱讀次數:976次   進入該公司店鋪我要詢價

工業包括生物藥生產、CAR-T、干細胞治療、疫苗生產等,需要對主細胞庫、病毒收獲液、體外擴增的細胞等進行支原體檢查。該檢查的方法依據中國藥典。科研檢支原體則需要保證細胞中沒有支原體污染,沒有詳細的方法規定。那么,工業和科研檢支原體還有哪些區別呢?

1. 方法上:

工業可使用培養法、指示細胞培養法和NAT法(核酸擴增技術)。NAT法常見的就是PCR和熒光定量PCR。只限定了這三種。NAT在方法驗證后,可以替代面兩種方法。它尤其適合CAR-T等的放行檢測。

科研則可采用各種方法,但般不采用培養法,因為太慢。科研檢支原體常見方法有PCR法、qPCR法、酶熒光法、恒溫擴增法、DNA染色法、細胞感應法等。

2. 用途上:

工業檢支原體用于過程控制、放行檢測。生產和生產后的成品都需要檢。

科研檢支原體是避免支原體污染細胞,干擾實驗,般是周就要監測次。

3. 支原體污染程度:

工業上支原體污染風險主要是存在于細胞和成品中。但環境也需注意,需要定期清潔。

科研上支原體污染風險主要是存在于細胞中,但環境也需注意,需要定期清潔。

工業上,支原體在細胞和成品中如果發生污染,也是含量較低,因而需要方法的靈敏度高,通常要求檢測限達到10CFU/ml。

科研上,支原體如果污染細胞上清,則因為培養液中含有血清,因而繁殖較快,支原體的污染程度較高,通常每ml能達到10的3次方。因而對方法的靈敏度要求不高,而更看重方便。

目,市面上大量存在各種品牌的支原體檢測產品,以NAT(PCR或qPCR)方法而論,科研和工業域可考慮德國Minerva Biolabs產品,因其產品大多為凍干粉型,穩定性好,4度即可保存。而且操作較為方便,例如對于科研來說,PCR有預分裝型,不用自己再分液,擴增后直接上膠。更重要的是試劑盒靈敏度高,覆蓋支原體物種廣(100多種)。對于工業來說,qEP和Classic試劑盒還經過全面的方法驗證,適合放行檢測。

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